| 產品名稱 |
人膠質瘤組織源性原代細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4282 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術后的膠質瘤組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
神經膠質瘤來自神經系統(tǒng)支持組織，屬外胚葉腫瘤，很多膠質瘤其瘤細胞與成熟 的或未成熟的膠質細胞相似。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
（1）星形細胞瘤 ①發(fā)生： 由星形細胞發(fā)生，占膠質瘤中的半數(shù)以上，成年人多發(fā)生在大腦半球，小兒多發(fā)生在小 腦。其它如丘腦、腦干和脊髓均可發(fā)生，星形細胞瘤可分為纖維型和原漿型兩類，腫瘤在腦 內呈浸潤性生長，大小不一，可以侵犯1 個或2 個以上的腦葉，甚至經胼胝體侵入對側大腦 半球。 ②大體形態(tài)： 纖維型星形細胞瘤比較硬韌，原漿型星形細胞瘤質軟，?？梢娪心倚宰?，瘤內出血和壞 死比較少見。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由分化比較成熟的星形細胞組成，纖維型星形細胞瘤富于膠質纖維，原漿型星形 細胞瘤富于細胞漿，若是星形細胞比較密集，細胞有異型性，且見絲狀核分裂像，血管內皮 細胞和外膜細胞增生，小灶狀出血和壞死，則稱星形母細胞瘤，或稱分化不良星形細胞瘤。 （2）多形性膠質母細胞瘤 ①發(fā)生： 是成年人比較多見的惡性膠質瘤，發(fā)生率僅次于星形細胞瘤，多發(fā)生在大腦半球，很少 發(fā)生在小腦。②大體形態(tài)： 腫瘤浸潤范圍比較大，可以侵犯幾個腦葉，或經胼胝體侵犯對側大腦半球，腫瘤質軟， 灰紅色，常出現(xiàn)大片出血和壞死區(qū)，瘤周圍組織顯著水腫，甚至液化，出現(xiàn)假性分界，其實 瘤細胞浸潤范圍遠較肉眼所見廣泛得多。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞分化不成熟，多形性，異型性，有較多核分裂像，常出現(xiàn)單核和多核瘤巨細胞。 血管內皮細胞和外膜細胞顯著增生，血管腔內有血栓形成，散在大片出血和壞死，分化 不良星形母細胞瘤沒有明確的區(qū)。 （3）少突膠質細胞瘤和少突膠質母細胞瘤 ①發(fā)生： 由少突膠質細胞發(fā)生，患者多是中年人，也可見于兒童，主要發(fā)生在大腦半球白質內。 ②大體形態(tài)： 腫瘤質軟，灰紅色，界限不清，常有鈣化和囊性變。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞形態(tài)比較一致，胞核圓形，深染，核周胞漿因水腫而顯空白，間質少，常見鈣化 灶和囊腫形成若是瘤細胞大小、形態(tài)、核染色性不一致，并出現(xiàn)巨瘤細胞，具有核分裂像， 血管內皮細胞增生，有出血和壞死，則稱少突膠質母細胞瘤。 （4）室管膜瘤和室管膜母細胞瘤 ①發(fā)生 常和腦室壁和中央管有聯(lián)系，多見于第四腦室、側腦室和脊髓內，患者多為幼兒和青年 人。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，質軟，多呈結節(jié)狀突于腦室腔內或位于腦或脊髓實質內。 ③顯微鏡下形態(tài)：室管膜瘤分為上皮型、乳頭型、乳頭粘液型和細胞型四種。（5）混 合性膠質瘤 腫瘤是由兩種或者兩種以上的膠質瘤類型所組成，各占相當?shù)姆至?，這種膠質瘤多見于 小兒，可見于小腦及大腦內，肉眼觀察與一般膠質瘤形態(tài)無異，需依靠組織學檢查來診斷。 （6）髓母細胞瘤 ①發(fā)生 是小兒顱內較常見的惡性腫瘤，主要發(fā)生在小腦蚓部，可突入第四腦室內，亦可侵入周 圍組織，常沿腦脊液呈種植性播散。 ②大體形態(tài)： 腫瘤紫紅色，粘凍狀，與腦實質之間界限不清，出血壞死少見。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細胞密集，間質少，瘤細胞小，胞核園形或橢圓形，深染，胞漿少，核分裂像多 見，細胞常呈假菊花形排列，如腫瘤侵及軟膜，常伴有纖維結締組織的明顯增生。 （7）脈絡叢乳頭狀瘤 ①發(fā)生 由腦室內脈絡叢發(fā)生，好發(fā)于第四腦室和側腦室可經第四腦室側孔突入小腦橋腦角 內生長。②大體形態(tài)：腫瘤呈粉紅色，質軟，表面呈絨毛狀，常見有鈣化。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織呈乳頭樣結構，外覆蓋著分化良好的上皮細胞，可有鈣化或砂粒小體形成， 其惡性類型稱脈絡叢乳頭狀癌。 ①發(fā)生 比較少見，多發(fā)生在青年人，常見在第三腦室后部，即松果體部位。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，球形，無包膜形成。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由單一的上皮樣細胞組成，胞體大小中等，核圓或橢圓形，含較多染色質而 深染，大多沒有核仁，胞漿淡而界線不清，分布于纖維組織所形成的間質中，一般無核分裂 像，松果體母細胞瘤則由較密集的小細胞組成，其分化程度低，細胞核小而密集，胞漿稀少, 染色極深 |
