產(chǎn)品名稱(chēng) |
人腎癌組織源性原代細(xì)胞 |
商品貨號(hào) |
MZ-4272 |
組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的腎癌組織。 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
病理分類(lèi) |
根據(jù)腫瘤的來(lái)源,主要分為: 1、來(lái)自腎實(shí)質(zhì)的腫瘤,有腎腺瘤和腎癌(又稱(chēng)腎細(xì)胞癌); 2、來(lái)自腎盂上皮的腫瘤,有移行乳頭狀瘤、移行細(xì)胞癌、鱗形細(xì)胞癌和腺癌; 3、來(lái)自腎胚胎組織的腫瘤,有腎母細(xì)胞瘤(即Wilms 腫瘤)、胚胎癌和肉瘤; 4、來(lái)自間葉組織的腫瘤,有纖維瘤、纖維肉瘤、脂肪瘤、脂肪肉瘤、平滑肌瘤和平滑肌肉 瘤; 5、來(lái)自血管的腫瘤有血管瘤、淋巴瘤和錯(cuò)構(gòu)瘤; 6、來(lái)自神經(jīng)組織的腫瘤有神經(jīng)母細(xì)胞瘤、交感神經(jīng)母細(xì)胞瘤; 7、來(lái)自腎包膜的腫瘤,有纖維瘤、平滑肌瘤、脂肪瘤、混合瘤; 8、囊腫,有孤立性囊腫、多發(fā)性囊腫、囊腺瘤、皮樣囊腫、囊腺癌; 9、轉(zhuǎn)移性腫瘤。形態(tài)與其他器官所見(jiàn)者相同。 |