一、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)
2. 組織來源:骨髓
3. 產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4. 細胞簡介:
小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;DC細胞,全稱樹突狀細胞(DC),是近年來倍受們關注的專職抗原呈遞細胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動T細胞介導的免疫反應。由美國學者Steinman于1973年首次在淋巴結中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞形態(tài)和功都不同的白細胞,因其細胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細胞。未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)。
本公司生產(chǎn)的小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×105cells/瓶;細胞純度可達85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
RPMI-1640、FBS、樹突狀細胞誘導添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)的培養(yǎng)基。
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
小鼠骨髓樹突狀細胞(DC細胞)是一種高度分化細胞,只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗,此細胞不建議傳代。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 細胞處理
1) 收集T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用PBS清洗細胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;
2) 1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細胞沉淀;
3) 加入5ml新鮮完全培養(yǎng)基,用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞;將分散好的細胞接種至培養(yǎng)器皿中,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參